红鳍东方皮肤溃烂病病原菌的分离与鉴定

从体表溃烂的养殖红鳍东方鲀(Fugu obscurus)病灶处分离到1株优势生长菌,编号为H-06091.分别通过创伤浸泡和注射方式感染健康红鳍东方鲀,发现这两种途径均可引发皮肤溃烂,两种途径的感染率均为100%,2×108 cell/mL.菌浓度注射组死亡率为100%,4×107 cell/mL菌浓度注射组死亡率为50%,创伤浸泡感染未见死亡.药敏实验表明,复方新诺明、呋喃妥因、链霉素、环丙沙星、利福平、红霉素、氟哌酸、氟嗪酸、庆大霉素、阿米卡星、四环素、青霉素G等抗菌素对H-06091有较强的抑制作用.按照<常见细菌系统鉴定手册>进行菌种鉴定并测定其16S rRNA基因序列,结果表明,该菌呈革兰氏染色阴性,氧化酶阳性,接触酶阳性,V-P试验阴性,硝酸盐还原反应阳性等特征,符合哈氏弧菌(Vibrio harveyi)特征,其16s rRNA基因序列与GenBank中哈氏弧菌同源性为99%,因此将H-06091鉴定为哈氏弧菌.     

闽南地区鲍溃烂病的研究

导致鲍发生溃烂的原因有多种。本研究通过对闽南地区鲍溃烂病的研究结果发现：除了已报道的荧光假单胞杆菌和亮弧菌一Ⅱ外哈维氏弧菌也是鲍溃烂病的主要病原。哈维氏弧菌导致发病养鲍池的COD值升高、pH值降低，异养菌数剧增并以弧菌为主；使用已报道的防治方法疗效不显著，却对妥布霉素、利复平、头孢三嗪、环丙沙星、呋喃妥因等药物敏感。     

拟态弧菌外膜蛋白OmpU 基因的原核表达及其免疫保护性研究

自行构建的pMD18T-OmpU重组克隆质粒经BamHI/EcoRI双酶切后,定向插入原核表达质粒pGEX-4T-1中构建重组表达质粒pGEx-4T-1-OmpU.将重组表达质粒转化至大肠杆菌E.coli BL21进行IPTG诱导表达.表达产物经SDS-PAGE电泳及Western-blot分析显示,以包涵体形式表达的GST-OmpU融合蛋白的分子量约为62.9 kD,可与鼠抗拟态弧菌外膜蛋白(Omps)免疫血清发生特异性反应,提示重组OmpU保留了天然Omps的抗原性.用纯化的融合蛋白免疫昆明系小鼠,以50LD50拟态弧菌(5×103CFU/mL)攻击,小鼠的免疫保护率为60%(9/15).表明OmpU是拟态.弧菌的保护性抗原之一,具有研发成为外膜蛋白基因工程亚单位苗的潜在价值.     

地中海弧菌Vibrio mediterranei 117-T6的溶藻活性

很多藻类致病菌具有广谱溶藻活性。本研究发现紫菜黄斑病致病菌地中海弧菌Vibrio mediterranei 117-T6（Vm 117-T6）对赤潮异湾藻、颗石藻、叉编金藻和东海原甲藻等微藻也具有较强的溶藻活性，可使其叶绿素含量显著降低，是一株广谱性溶藻细菌。Vm 117-T6能在40 min内使赤潮异弯藻的活动能力下降，光合作用受抑，感染120 min即可导致藻体裂解并产生白色絮状沉淀。Vm 117-T6能降解卡拉胶，不能降解果胶、纤维素和几丁质。菌体、胞内及胞外提取物均具有较强的溶藻活性，其胞外溶藻物质易溶于水、不溶于石油醚和乙酸乙酯，具较强极性；耐高温、不易被活性炭吸附、乙醇处理会降低溶藻活性。Vm 117-T6在常规与易感条件下的关键差异蛋白包括大量的ABC转运蛋白、外膜蛋白、鞭毛蛋白及少量Toxin。这些研究结果提示Vm 117-T6毒力效应物中含有极性非蛋白质类物质，且与毒力因子转运、分泌以及细胞黏附相关的蛋白可能在其毒力作用中发挥重要作用。上述研究结果表明：多种溶藻机制参与了Vm 117-T6的溶藻过程。     

一株副溶血弧菌的分离和鉴定

从患病的凡纳滨对虾体内分离了一株致病菌。对该菌进行了常规的生理生化鉴定,确认该菌为副溶血弧菌;该菌在第6 h就进入对数早期,对数期一直持续到22 h;用该菌腹腔注射小白鼠,对小白鼠半数致死量LD50为7.6×106cfu/g。     

Surface-exposed expression of Edwardsiella tarda EseB in live attenuated Vibrio anguillarum based on novel surface display systems

Live, attenuated Vibrio anguillarum strains can serve as vectors for the delivery of heterologous antigens for development of multivalent recombinant vaccines. Based on the outer membrane anchoring elements of V. anguillarum , we have previously constructed several efficient surface display systems Lpp-Omporf1, Lpp-OmpU, Lpp-Omp26La, Wza-Omporf1, Wza-OmpU and Wza-Omp26La. In this study, with these constructed surface display systems, a putative antigen protein EseB from pathogenic Edwardsiella tarda was successfully expressed on the surface of an attenuated V. anguillarum strain to get multivalent vaccine candidates. Further immune protection evaluation in zebra fish ( Danio rerio ) demonstrated that the V. anguillarum EseB-display strain AV/pW-26La-B could trigger full protection against V. anguillarum infection and early protection against E. tarda infection in the immunized fish. These results suggest that surface display of heterologous protective antigens in attenuated V. anguillarum could be used as a tool to develop potential V. anguillarum vector vaccine.     

河流弧菌在天然海水与人工海水中的饥饿效应

对数生长期河流弧菌分别悬浮于天然海水和人工海水后于28℃进行饥饿试验.在饥饿初期,两种海水中河流弧菌的总菌数、活菌数、菌落形成单位数都明显上升,但天然海水中的河流弧菌生长时间持续更久、增长幅度也更大;饥饿中、后期,总菌数都保持稳定,而可培养菌数与活菌数逐渐下降,其中可培养菌数下降幅度高于活菌数,人工海水中的河流弧菌下降幅度高于天然海水.河流弧菌对青石斑鱼表皮粘液的粘附量随着饥饿时间延长先上升后下降.与对数生长期相比,饥饿60 d的可培养细胞对热和紫外线的耐受性提高.饥饿细胞的间接ELISA最低检测限高于对数生长期细胞.通过SDS-PAGE分析菌体蛋白发现饥饿细胞的蛋白质条带减少.腹腔注射饥饿60 d的河流弧菌不会引起小鼠死亡,而对数生长期细胞能够引起小鼠死亡.研究结果表明,河流弧菌能够在温暖的人工海水和天然海水中长时间饥饿存活,但是饥饿细胞的毒力较低.     

鸡弧菌性肝炎的病理学研究

本文对产蛋母鸡发生鸡弧菌性肝炎后所表现出的临床症状及尸体剖检变化和病理组织学变化作了较为详细的观察与研究，为鸡弧菌性肝炎的进一步研究和临床诊断提供一定的理论依据